CIÊNCIA COLORIMÉTRICA

Meu sonho científico é que tudo fosse colorido. Todas as etapas utilizassem de cores para avisar que está realmente dando certo. Principalmente para quem trabalha com biologia molecular, que trabalha meses, às vezes anos, para só no final saber o resultado.

Tem uma enzima, a beta galactosidase, que quebra um molécula chamada lactose que é amplamente utilizada em técnicas de clonagem de bactérias e leveduras com controle de expressão.

Há alguns meses, utilizei uma idéia “maluca” da minha orientadora de selecionar cultivos produtores dessa enzima ao mesmo tempo que as bactérias cresciam em meio liquido (detalhes abaixo), adorei! Tudo coloridinho, como nos meus sonhos...

Recentemente fazendo extração plasmidial utilizei kit que seguia a ideia “coloridinha” (depois coloco aqui), assim como a GoTaq green (PROMEGA) que não precisa colocar o loading buffer. PCR verdinho!

Detalhando> Os três tubos (A, B e C) são cultivos em meio LB da bactéria Escherichia coli BL21 que possuem o plasmideo pET16b com o gene da enzima beta-galactosidase. Em todos os tubos há antibiótico (50 µg/ml de ampicilina) e indutor da expressão desse gene (IPTG 0,5mM). No tubo A, não há substrato; no tubo B e C há substratos, o qual resultaram em cor caso a enzima os clivassem, no tubo B (500 µl de ONPG a 8 mg/ml - amarelo), no tubo C (5 µl de X-gal a 50mg/ml – azul). As culturas positivas rapidamente (+ou-4h) já apresentam cor quando incubadas a 37°C em agitação de 150 rpm.